植物原位杂交测试服务-科锐诺生物

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    2023-5-4

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1,组化

实验原理:组化(ihc),是应用抗原与特---结合的原理,通过酶标与底物反应显色,从而对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,称为组织化学技术。组化(ihc)具有特---强、敏感度高、定位准确的优点。

1, 荧光

实验原理:荧光(if),是应用抗原与特---结合的原理,通过荧光标记对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究。目前皮诺飞生物主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行荧光检测。皮诺飞生物目前已突破传统的荧光双标---,开发出多色荧光技术(多可达7色)。



原位杂交是在分子生物学领域应用---广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种---重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization,其中in situ为拉丁文,字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的---探针与组织切片或细胞中的待测---中的互补序列杂交, 从而对组织细胞中的---进行定性、定位和相对定量分析。是一种直接、简便的研究基因定位和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理



后固定:胃蛋白酶---后才需要。固定液为1%---/0.1 m pbs(ph7.2-7.6),含有1/1000 depc。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。

  原位杂交的预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,植物原位杂交测试服务,不洗。

   杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。

杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×ssc洗涤5分钟×2次;37℃0.5×ssc洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×ssc洗涤15分钟×1次(如果有非特---染色,重复0.2×ssc洗涤15分钟×1-2次)。

     



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