自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬体，其直径一般为 300 ~ 900 nm，平均 500 nm，囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、---化物酶体等。与其他细胞器相比，exo检测，自噬体的半衰期很短，只有 8 min 左右，说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。
itraq (isobarictags for relative&absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由ab sciex公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将itraq标签与肽段的n-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可---itraq试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一itraq试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。
外泌体研究开展的如火如荼。不论是 sci 文章的发表还是各类基1金的申请，外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后，研究人员面临的一个重要问题就是，我提取的是不是外泌体？如果是的话，如何？
现阶段，对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法：电镜、粒径和 western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结，今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒---分析（nanoparticle tracking ---ysis， nt a)，其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合 stockes-einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。nt a技术已被外泌体研究领域---为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式，nt a技术的样本处理更简单、更能---外泌体原始状态、检测速度更快。
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