





原位杂交第二天
1.
1)将探针回收,放于-20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。
2)加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,染色体原位杂交技术服务公司,60℃,放置30分钟,重复一次。
3)置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。
4)置换0.2xssct1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。
2.
1)用mabt洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。
2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4c 冰箱过夜。
染色体原位杂交实验的基本原理是利用特定标记的已知碱基序列的---探针,依据碱基互补配对原理,与中期染色体玻片标本中的同源 dna 序列进行杂交。
标记可以用放1射性同位素(3h、35s、32p),然后进行放1射自显影;也可以用非放1射性的荧光素生物素、地1高辛,再用荧光显微镜进行观察,即荧光原位杂交(fluorescent in situhybridization,fish)技术。

意义
免yi组织化学的---应用主要包括以下几方面:
(1)的诊断与鉴别诊断;
(2)确定转移性的原发部位;
(3)对某类进行进一步的病理分型;
(4)软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;
(5)发现微小转移灶,有助于---方案的确定,包括手术范围的确定。
(6)为---提供方案的选择。
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