





外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。

外泌体作为活1细胞分泌的含有rna 和蛋白质的微囊泡,直径为 30-150nm之间,广泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多种---中。研究表明,外泌体包含多种活性分子,如蛋白质、脂肪和---(mrna、mirna 及其它非编码rna ) 等, 能作为信号分子传递给靶1细胞,介导细胞间的物质传递与信息交流,文献------中外泌体 rna (---是mirna 等非编码rna)在不同的---模型中存在明显的表达差异。同时,这些分子被外泌体的脂膜所包裹和保护, 能保持其原有稳定性和生物学功能,外泌体鉴定服务, 已经成为液体活检的重要分子标志物。近年来, 外泌体已成为科研---,其在---上---的应用价值, 引起了众多研究者以及商业人士的浓厚兴趣。随着相关技术的发展, 有关外泌体在------(尤其是肿1瘤)的早期诊断、治1疗、预后及伴随诊断的应用研究正在蓬勃开展。通过高通量技术对外泌体 rna进行测序, 可快速高1效获得外泌体rna 的全1面信息,是---诊断和随访的理想手段。

外泌体的生物学功能:1、首1次---的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。
2、进一步的研究表明其功能包括排泄不---的蛋白质和rna等物质。
3、可促进生物体免1疫应答反应。
4、对凝血和血管生成其促进作用。
5、可通过化学信号参与癌细胞的转移。
6、在哺乳期的免1疫调节过程中起到重要的作用。
7、不仅参与触发下游信号传导,而且特---靶向受体细胞和交换蛋白。
8、可提供特殊的---且起到运输功能。
9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。
10、在---和朊蛋白等多种病原体之间起着独1特的作用。
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