





滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗。
.滴加生物素化鼠抗地1高辛:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
滴加sabc:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
滴加生物素化---化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×4次。
dab显色:使用dab显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂a,b,c各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配dab显色剂后显色。充分水洗。
.苏1木素复染,充分水洗。
酒精脱水,二甲1---透明,封片。
多彩色荧光原位杂交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,mfish)。它用几种不同颜色的荧光素单独或者混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个基因,扩大了fish技术的---应用。fish技术目前主要应用于染色体和dna水平上的病理诊断检测。染色体fish主要检测染色体易位、缺失、重复、变异等;dnafish主要是检测基因突变、扩增、易位、缺失。与原位杂交技术相比,fish安全、快速,特---好、定位准确。

pcr技术是一种在生物体细胞外通过酶促合成特异dna或dn---段的方法。其原理是设计特异引物,在taqdna聚合酶催化作用下,分子病理技术服务,经过高温变性、低温退火和适温延伸3个步骤反复循环,对某一特定模板的特定区域进行扩增,反应结束后应用凝胶电泳或测序等方法分析产物。因此,该技术可以直接检测---组织、细胞中是否存在某种---dna,同时pcr技术还是基因突变检测的前期---技术。

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