植物基因组原位杂交检测服务-武汉科锐诺

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    2023-7-10

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杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,植物基因组原位杂交检测服务,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。

把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加x片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。

底片显---,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。




适用场景

1、高灵敏度地检测蛋白-蛋白的交互作用;

2、寻找在蛋白-蛋白交互作用中起关键作用的结构域或活性位点;

3、寻找与靶蛋白相互作用的新蛋白;

4、寻找具有药1物治1疗作用的小分子多肽;

5、寻找调控蛋白质相互作用的化合物;

6、绘制蛋白质相互作用图谱。

酵母双杂交技术的优点

1、无需纯化蛋白;

2、检测在活1细胞内进行,可以在一定程度上代表体内的真实情况;

3、检测的结果是基因表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用;

4、酵母双杂交系统可采用不同组织、器1官、细胞类型和分化时期材料构建cdna---,并能分析细胞质、细胞核等多种亚细胞部位的蛋白。









近年来---在结1核病诊断中应用越来越广泛,但主要应用于痰液等新鲜标本,在石蜡包埋组织标本中应用非常少。我们建立了利用荧光定量pcr及膜探针杂交法鉴别诊断结1核病与非结1核分枝杆1菌病的分子病理检测方法;建立了利用高分辨溶解曲线法检测1线抗结1核核1心药1物---及---的耐药情况的分子病理检测方法。我们在首都---医学发展专项的资助下进行大样本---验证。这些方法也将陆续转化为我院分子病理诊断项目。








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