





点对点酵母双杂交验证实验流程
1、诱饵蛋白毒性及自激1活检测;
2、共转化:分别将诱饵/捕获质粒(pgbkt7-bait/pgadt7-prey)、阳性对照质粒(pgbkt7-p53/pgadt7-t)、阴性对照质粒(pgbkt7-lam/pgadt7-t)分别共转到y2h gold感受态细胞中,涂布于ddo平板培养;
3、点板验证:分别从平板上挑单克1隆稀释10倍、100倍、1000倍,擅长染色体原位杂交的公司,然后点板到tdo/x/a和qdo/x/a固体培养基进行验证;
4、实验数据与报告整理。

目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、pcr、荧光定量pcr、基因芯片和dna测序技术。显色原位杂交(chromogenicinsituhybridization,cish)技术是分子生物学、组织化学及细胞学相结合产生的一门新兴技术,是利用---分子单链间碱基互补的原理,将地1高辛或生物素标记的外源---探针与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成双链杂交分子,通过---化物酶或碱性磷酸酶的呈色反应将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。根据探针种类不同可分为dna原位杂交和rna原位杂交。

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