外泌体粒径及浓度检测-武汉科锐诺生物

透射电镜作为鉴定外泌体的金标准，一直是科锐诺生物主营的业务之一。透射电镜点分辨率可以达到0.1nm，非常适合用来观察外泌体类囊泡。客户只需要寄送新鲜或者冻存的外泌体样品，我们负责从制片到观察的全套检测服务。一个样品提供2个放大倍数，外泌体粒径及浓度检测，10-15张照片。检测周期为7个工作日。

　　在透射电镜基础上，用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记，利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点，同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得---形态的外泌体，又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。

外泌体装载着各种免1疫相关分子，通过这些分子来调节免1疫应答。例如，在细胞---性t细胞或者自然---性细胞来源的外泌体上，携带fas配体、trail、cd40配体等tnf家族蛋白，可---靶1细胞凋亡。

有---称，癌细胞中也可以释放装载着fas配体或trail等的外泌体，---免1疫细胞凋亡，使癌细胞免受免1疫细胞的攻击。一般情况下，tnf家族蛋白以膜结合形式产生，被膜型金属蛋白酶切割后转变为可溶性蛋白。膜结合蛋白主要担负---细胞凋亡的功能，但可溶性蛋白的活性较弱。

itraq (isobarictags for relative&absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由ab sciex公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将itraq标签与肽段的n-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可---itraq试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一itraq试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。




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