





nta可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,但不能够以nta所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解nta检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过nta所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,组织外泌体提取检测,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。

除了用nta方法,该团队另基于acetylcholinesterase(一种已知的外泌体表达蛋白)评估三种试剂盒提取外泌体的得率。从nta结果看,对于血1清和血浆样本,exo-spin的提取量高,是其他两种试剂盒的1-3倍;相对来说,脑脊髓液的提取率都比较低,exoquick?提取得到的外泌体浓度低。从基于acetylcholinesterase的分析结果看,其数值高于nta方法,且exo-spin得到的外泌体浓度高于其他两种试剂盒。

外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(hsp 70)、cd类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式:
1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。
2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法:这种方法可以---外泌体形态的完整,特---高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不广泛。
组织外泌体提取检测-科锐诺生物(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司为客户提供“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”等业务,公司拥有“科锐诺”等品牌,---于技术合作等行业。,在湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼的名声---。欢迎来电垂询,联系人:王经理。
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