分子病理技术服务-科锐诺生物

既要充分保留被测---，（---是rna）不被降解，分子病理技术服务，又要尽可能维持原有组织或细胞的形态结构。

步骤：基本与免1疫组织化学技术相似，即组织要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%---/0.1 m pbs（ph7.0-7.6），含有1/1000 depc。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经rna酶抑制处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳，40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃---温冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存数月之久。

　　荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization，fish)技术基本原理与显色原位杂交相同，不同之处在于fish是应用荧光素标记的探针与组织细胞中待测---反应形成杂交体，并采用荧光显微镜或激光共---显微镜观察信号表达。为了同时检测多个靶位，在荧光原位杂交技术的基础上发展起来一种新技术，即多彩色荧光原位杂交

原位杂交

实验原理

原位杂交技术（in situhybridization）是以标记的---分子为探针，在组织细胞原位检测特异---分子的技术。

使含有特异序列、经过标记的---单链即探针，在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交，再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。

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