





癌组织原位杂交实验步骤:
1. 将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2. 玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或apes。
3. 石蜡切片经常规脱蜡至水。30%h2o2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4. 暴露mrna---片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温---3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。原位杂交用pbs洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。

应用于分子病理诊断的dna测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生a、t、c、g4组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测,从而获得dna序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”,其优点是结果准确,重复性好,可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多,耗时长,灵敏度低,过程不易控制,在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量pcr法替代。

分子病理学是与分子生物学、细胞遗传学等学科相互渗透,植物组织原位杂交检测服务,在蛋白质和---等生物大分子水平上研究---病因、发病机制、形态变化及功能损害等方面发生和发展规律的新的分支学科,对---的病因、发展、发病机制及形态变化,从传统形态学概念深入至分子或基因水平,分子病理已成为肿1瘤病理研究中重要的内容和手段。细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;
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