科锐诺生物科技-分子病理技术服务

菌落的裂解及dna结合于纤维素滤膜

（1） 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/l naoh的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，将滤膜放到小洼上，展平保鲜膜，使滤膜均匀湿润，让滤膜留于原处2-3分钟。

（2） 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜，用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/l naoh重复步骤（1）。

（3） 吸干滤膜，将滤膜转移到新的带有1mol/l tris·cl(ph7.4）的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜，再重复一次该步骤。

（4） 吸干滤膜，把它转移到有1.5mol/l nacl、0.5mol/l tris·cl (ph7.4）的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜，分子病理技术服务，转移到一张干的滤纸上，置于室温20-30分钟，使滤膜干燥。

（5） 将滤膜夹在两张干的滤纸之间，在真空烤箱中于80℃干烤2小时，固定dna。

（6） 将固定在膜上的dna与32 p标记的rna进行杂交。

原位杂交试验

收集斑马鱼的胚胎，在holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%---固定，在4℃保存，二十四小时后用50%2%---溶液洗，然后换成，在-20c 保存，待用（两天和两天以上的胚胎需要用处理，去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成） 武汉科锐诺生物科技有限公司

近年来---在结1核病诊断中应用越来越广泛，但主要应用于痰液等新鲜标本，在石蜡包埋组织标本中应用非常少。我们建立了利用荧光定量pcr及膜探针杂交法鉴别诊断结1核病与非结1核分枝杆1菌病的分子病理检测方法；建立了利用高分辨溶解曲线法检测1线抗结1核核1心药1物---及---的耐药情况的分子病理检测方法。我们在首都---医学发展专项的资助下进行大样本---验证。这些方法也将陆续转化为我院分子病理诊断项目。

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