科锐诺生物-植物原位杂交技术服务

原位杂交第三天

1） 用1ml含10%热灭清的mabt溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlmabt置换，25分钟，再用1mlmabt溶液置换，一小时以上，后用1mlmabt溶液置换，25分钟。

2） 用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次，每次放置五分钟。

3）将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul bm purple ap substrate（底物，用之前加5mm左旋米唑），十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。

4）每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5）将显色完全的胚胎中的底物吸出，用pbst洗两三次后加上4%---固定，拍照。

6）4c冰箱保存。

目前，我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、pcr、荧光定量pcr、基因芯片和dna测序技术dna原位杂交主要用于基因定位、特异基因(如病原微生物基因)检测等;rna原位杂交则用于基因表达检测。原位杂交技术的优点是操作简单，可直接定位组织，植物原位杂交技术服务，价格低廉，信号稳定，储存方便，可做组织学评价，是目前应用较多的分子病理技术之一。

1、组织取材：组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快，所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。

       2、细胞组织固定目的与注意事项：

       （1）保持细胞结构；

       （2）大限度地保持细胞内dna或rna的水平；

       （3）使探针易于进入细胞或组织。

        常用的固定剂是---，与其它醛类固定剂不同，---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接，因而不会影响探针穿透入细胞或组织。

植物原位杂交技术服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。行路致远，---。武汉科锐诺生物科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的---，更矢志成为技术合作具有竞争力的企业，与您一起飞跃，共同成功!
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