





外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(hsp 70)、cd类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式:
1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。
2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法:这种方法可以---外泌体形态的完整,特---高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,外泌体鉴定技术服务,应用不广泛。
外泌体不仅含有蛋白质抗原,还含有分泌细胞来源的mrna或non-coding rna(---是mirna),其功能引起广泛关注。外泌体的脂质双分子层膜可保护这些rna,不被rnase分解,在---、---中稳定存在。在外泌体及其分泌细胞中均可检测出rna,也存在仅能在其中之一检测出rna的情况,因此我们设想存在一种可以选择性将特定的rna吸收至外泌体的机制。
样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;
注意:nta仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特---标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。

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