科锐诺-分子病理技术服务

原位杂交杂交液注意事项：

       （1）杂交液内除含一定浓度的标记探针外，还含有较高浓度的盐类、---胺、---葡聚糖、牛血1清白蛋白及载体dna或rna等。

       （2）杂交液中含有较高浓度的na+可使杂交率增加，可以减低探针与组织标本之间的静电结合。---胺可使tm降低，杂交液中含每1%的---胺可分别使rna：rna，rna：dna，dna：dna的杂交温度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。，所以杂交液中加入适量的---胺，可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。---葡聚糖能与水结合，从而减少杂交液的有效容积，提高探针有效浓度，以达到提高杂交率的目的（尤其对双链---探针）。

       在杂交液中加入牛血1清白蛋白及载体dna或rna等，分子病理技术服务，都是为了阻断探针与组织结构成分之间的非特---结合，以减低背景。

点对点酵母双杂交验证实验流程

1、诱饵蛋白毒性及自激1活检测；

2、共转化：分别将诱饵/捕获质粒（pgbkt7-bait/pgadt7-prey）、阳性对照质粒（pgbkt7-p53/pgadt7-t）、阴性对照质粒（pgbkt7-lam/pgadt7-t）分别共转到y2h gold感受态细胞中，涂布于ddo平板培养；

3、点板验证：分别从平板上挑单克1隆稀释10倍、100倍、1000倍，然后点板到tdo/x/a和qdo/x/a固体培养基进行验证；

4、实验数据与报告整理。