





应用于分子病理诊断的dna测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生a、t、c、g4组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测,从而获得dna序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”,其优点是结果准确,重复性好,可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多,耗时长,染色体原位杂交技术服务,灵敏度低,过程不易控制,在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量pcr法替代。

目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、pcr、荧光定量pcr、基因芯片和dna测序技术。显色原位杂交(chromogenicinsituhybridization,cish)技术是分子生物学、组织化学及细胞学相结合产生的一门新兴技术,是利用---分子单链间碱基互补的原理,将地1高辛或生物素标记的外源---探针与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成双链杂交分子,通过---化物酶或碱性磷酸酶的呈色反应将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。根据探针种类不同可分为dna原位杂交和rna原位杂交。

意义
免yi组织化学的---应用主要包括以下几方面:
(1)的诊断与鉴别诊断;
(2)确定转移性的原发部位;
(3)对某类进行进一步的病理分型;
(4)软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;
(5)发现微小转移灶,有助于---方案的确定,包括手术范围的确定。
(6)为---提供方案的选择。
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