





原位杂交杂交液注意事项:
(1)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、---胺、---葡聚糖、牛血1清白蛋白及载体dna或rna等。
(2)杂交液中含有较高浓度的na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。---胺可使tm降低,杂交液中含每1%的---胺可分别使rna:rna,rna:dna,dna:dna的杂交温度降低0.35℃,0.5℃和0.65℃。,所以杂交液中加入适量的---胺,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。---葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,植物茎原位杂交技术服务,以达到提高杂交率的目的(尤其对双链---探针)。
在杂交液中加入牛血1清白蛋白及载体dna或rna等,都是为了阻断探针与组织结构成分之间的非特---结合,以减低背景。

原位杂交
实验原理
原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的---分子为探针,在组织细胞原位检测特异---分子的技术。
使含有特异序列、经过标记的---单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。
pcr技术是一种在生物体细胞外通过酶促合成特异dna或dn---段的方法。其原理是设计特异引物,在taqdna聚合酶催化作用下,经过高温变性、低温退火和适温延伸3个步骤反复循环,对某一特定模板的特定区域进行扩增,反应结束后应用凝胶电泳或测序等方法分析产物。因此,该技术可以直接检测---组织、细胞中是否存在某种---dna,同时pcr技术还是基因突变检测的前期---技术。

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