染色体原位杂交实验的基本原理是利用特定标记的已知碱基序列的---探针，依据碱基互补配对原理，与中期染色体玻片标本中的同源 dna 序列进行杂交。
标记可以用放1射性同位素（3h、35s、32p），然后进行放1射自显影；也可以用非放1射性的荧光素生物素、地1高辛，再用荧光显微镜进行观察，即荧光原位杂交（fluorescent in situhybridization，fish）技术。
癌组织原位杂交实验步骤：
1. 将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2. 玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或apes。
3. 石蜡切片经常规脱蜡至水。30%h2o2 1份+蒸馏水10份混合，室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4. 暴露mrna---片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，分子病理技术服务，混匀），37℃或室温---3--30分钟（视标本新旧、厚薄自行调整）。原位杂交用pbs洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
荧光定量pcr(realtimepcr)技术是近几年基于普通pcr技术发展的一种新技术。它借助荧光信号来检测pcr产物，通过荧光染料或荧光标记的特异探针，对pcr产物进行标记---，在扩增过程中，每经过一次循环，荧光定量pcr仪就会收集一次荧光信号，实时检测整个pcr进程。用荧光定量pcr法检测目的基因仅需检测样本是否具有扩增信号即可，且pcr反应具有---扩增的高1效性，可检测出微小突变。根据探针标记不同可分为taqman探针法和aｒms法。分子病理技术服务-科锐诺生物科技(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供---的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：王经理。
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