武汉科锐诺-植物rna原位杂交技术服务

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    2023-9-19

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染色体发现距今已有150多年的历史,染色体检测被广泛用于动、植物及人类的细胞遗传学研究,随着染色体分技术和分子生物学技术的发展。染色体研究范围也不断扩大,---是用于肿1瘤分子诊断。肿1瘤细胞的染色体变化是一非常普遍的现象,可分为原发和继发两类。在肿1瘤形成的生物学基础方面,原发性的染色体变化与引起肿1瘤的直接原因有关,肿1瘤细胞中可以发现各种形式的染色体畸变,如缺失、重复、易位、重排、单体断裂及核内复1制等;继发性变化主要是肿1瘤细胞核型的改变。染色体的检测对于肿1瘤的诊断、鉴别诊断、生物学行为判别等方面都重要意义。染色体的检测方法进展很快,检测的精1确率也不断提高,




原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的pbst溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的pbst溶液,放置5分钟

3) 置换成pbst溶液,放置5分钟,重复一次

4) 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,植物rna原位杂交技术服务,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2) 用pbst溶液轻洗,在pbst中放置5分钟。

3) 用4%---的pbs溶液固定20分钟,室温。

4) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

2. 预杂交

1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的hyb+取代hyb-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

3. 杂交

1)吸去预杂交的hyb+,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。






分子病理学是一门新兴学科,是在基因水平上用分子生物学技术研究---发生1发展的一个病理学分支学科。分子病理学进行的检测通常称之为---,即取检测者的肿1瘤组织、胸水或---等,经提取和扩增其基因信息后,通过相应的分子生物学技术,对被检测者细胞中的dna分子的基因信息进行检测,分析他的基因状态,从而对肿1瘤的诊断或治1疗提供一定的帮助。



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