





外泌体不仅含有蛋白质抗原,还含有分泌细胞来源的mrna或non-coding rna(---是mirna),其功能引起广泛关注。外泌体的脂质双分子层膜可保护这些rna,不被rnase分解,在---、---中稳定存在。在外泌体及其分泌细胞中均可检测出rna,也存在仅能在其中之一检测出rna的情况,因此我们设想存在一种可以选择性将特定的rna吸收至外泌体的机制。
外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。

自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程,借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬体,其直径一般为 300 ~ 900 nm,平均 500 nm,胞外囊泡透射电镜测试服务,囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、---化物酶体等。与其他细胞器相比,自噬体的半衰期很短,只有 8 min 左右,说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。
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