科锐诺生物科技-分子病理技术服务

阻断内源性---化物酶：滴加3%1甲1醇-h2o2，室温避光孵育15min，将玻片置于pbs（ph7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

预杂交：滴加预杂交液，37°c孵育1h。

杂交：倾去预杂交液，滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液，浓度6ng/ul，恒温箱37度杂交过夜。

杂交后洗涤：洗去杂交液，2×ssc，37°c 洗10min，1×ssc，37°c洗2×5min，0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多，可以增加---胺洗涤。

滴加封闭液：滴加封闭血1清（正常兔血1清），室温30min。

滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶（anti-dig-hrp）：倾去封闭液，滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min，后pbs洗3次×5min。

分子病理学在蛋白质和---等生物大分子水平上，应用分子生物学理论、技术及方法研究---发生l发展的过程，分子病理技术服务，从而为传统的病理学注入了生机。在如今的---病理诊断过程中，运用---原位杂交、pcr技术、免1疫荧光、免1疫组织化学染色等技术，能够深化对---的本质认识，对于肿1瘤的诊断和治1疗也有着---的指导意义。分子病理学诊断主要应用于以下几个方面：1、对于肿1瘤---的检测，对于肿1瘤高危人群的筛检具有实用价值，如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿1瘤相关---的检测，如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。

原位杂交

实验原理

原位杂交技术（in situhybridization）是以标记的---分子为探针，在组织细胞原位检测特异---分子的技术。

使含有特异序列、经过标记的---单链即探针，在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交，再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。

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