





常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手i操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行---的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。

切片经he染色后,要脱水透明,才能用中性树胶封盖。he染色对于贴壁生长细胞,胰酶---,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用pbs 洗涤3次。着况与组织或细胞的种类有关。切片在苏mu素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(佳厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。染色的终结果是:细胞核呈蓝色、胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一样的红色,病理技术服务提醒:在进行he染色需要染色时间,脱水,染色时间不一样,需要等 ,明确he评判标准。

病理切片的制作步骤注意事项:
切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
组织片贴附,线粒体三维重构测试服务,应在除去标签位置后玻片的中间,各块组织的方向应一致。
封固前必须经酒精充分脱水,二甲1---透明,湿封。
封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚。
取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。
切片完成后交付---时必须按照记录当面清点。
切片是制片技能中要求---的步骤,即使同一蜡块,使用同一台切片机,不同的操作者也会切出不同的片子。
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