武汉科锐诺生物-植物组织rna原位杂交检测技术服务

既要充分保留被测---，（---是rna）不被降解，又要尽可能维持原有组织或细胞的形态结构。

步骤：基本与免1疫组织化学技术相似，即组织要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%---/0.1 m pbs（ph7.0-7.6），含有1/1000 depc。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经rna酶抑制处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳，40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃---温冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存数月之久。

近年来---在结1核病诊断中应用越来越广泛，但主要应用于痰液等新鲜标本，植物组织rna原位杂交检测技术服务，在石蜡包埋组织标本中应用非常少。我们建立了利用荧光定量pcr及膜探针杂交法鉴别诊断结1核病与非结1核分枝杆1菌病的分子病理检测方法；建立了利用高分辨溶解曲线法检测1线抗结1核核1心药1物---及---的耐药情况的分子病理检测方法。我们在首都---医学发展专项的资助下进行大样本---验证。这些方法也将陆续转化为我院分子病理诊断项目。

原理

根据抗原反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根---化物酶（hrp）或碱性磷酸酶（akp）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。

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