





原位杂交是在分子生物学领域应用---广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种---重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization,其中in situ为拉丁文,字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的---探针与组织切片或细胞中的待测---中的互补序列杂交, 从而对组织细胞中的---进行定性、定位和相对定量分析。是一种直接、简便的研究基因定位和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理

原理
原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,植物染色体原位杂交检测技术服务,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的---复性结合而使得组织细胞中的特------得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在---的原有位置上显示出来。
经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检dn---段或mrna进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检---的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mrna在胞质中的表达。

1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。
2、细胞组织固定目的与注意事项:
(1)保持细胞结构;
(2)大限度地保持细胞内dna或rna的水平;
(3)使探针易于进入细胞或组织。
常用的固定剂是---,与其它醛类固定剂不同,---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。

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