染色体原位杂交技术服务-武汉科锐诺

原位杂交的应用范围：

细胞特---mrna转录的定位，可用于基因图谱，基因表达和基因组进化的研究；

感1染组织中---dna/rna的检测和定位，如eb---mrna、人类乳1头状瘤1---和巨细胞---dna的检测；

癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测；

基因在染色体上的定位；

检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等；

分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定，某些肿1瘤的诊断和生物学剂量测定等。

将少数菌落转移到纤维素滤膜上

（1） 在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。

（2） 用无菌---将各个菌落先转移至滤膜上，再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种（或打点）。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后，在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。

（3） 倒置平板，于37℃培养至划线的---菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。

（4） 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂，在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。

（5） 用parafilm膜封好主平板，倒置贮放于4℃，直至获得杂交反应的结果。

（6） 裂解---，按本段下面所述方法，使释放的dna结合于纤维素滤膜。