





适用场景
1、高灵敏度地检测蛋白-蛋白的交互作用;
2、寻找在蛋白-蛋白交互作用中起关键作用的结构域或活性位点;
3、寻找与靶蛋白相互作用的新蛋白;
4、寻找具有药1物治1疗作用的小分子多肽;
5、寻找调控蛋白质相互作用的化合物;
6、绘制蛋白质相互作用图谱。
酵母双杂交技术的优点
1、无需纯化蛋白;
2、检测在活1细胞内进行,可以在一定程度上代表体内的真实情况;
3、检测的结果是基因表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用;
4、酵母双杂交系统可采用不同组织、器1官、细胞类型和分化时期材料构建cdna---,并能分析细胞质、细胞核等多种亚细胞部位的蛋白。

滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗。
.滴加生物素化鼠抗地1高辛:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
滴加sabc:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
滴加生物素化---化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用pbs洗5分钟×4次。
dab显色:使用dab显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂a,b,c各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配dab显色剂后显色。充分水洗。
.苏1木素复染,充分水洗。
酒精脱水,二甲1---透明,封片。
在酵母双杂交系统中,bd与x蛋白融合,ad与y蛋白融合,如果x、y之间形成蛋白-蛋白复合物,ad与bd会在空间上充分接近,重新构成结构域,启动报告基因的转录。拥有bd质粒的酵母可以在某一缺陷培养基上生长,分子病理技术服务,拥有ad质粒的酵母菌可以在另一种缺陷培养基上生长,通过接合(mating)或共转化使酵母同时拥有ad与bd质粒。如果bd上的目的蛋白与ad上的诱饵蛋白存在相互作用,这样的酵母可以在三缺及四缺的培养基上生长,并启动β-半乳糖苷酶基因的转录。

分子病理技术服务-科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司为客户提供“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”等业务,公司拥有“科锐诺”等品牌,---于技术合作等行业。,在湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼的名声---。欢迎来电垂询,联系人:王经理。
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