原位杂交第二天
1.
1）将探针回收，放于－20c保存（通常探针可重复使用十次左右）。
2）加入50%---胺/2xssct溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。
3）置换2xssct1ml，60℃，放置15分钟。
4）置换0.2xssct1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。
2.
1）用mabt洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。
2）室温下加1ml 1：2：7溶液，时间为一小时。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4c 冰箱过夜。
滴加fitc-tsa：滴加fitc-tsa试剂，避光室温反应5min。后tbst洗3次×10min，pbs洗1次×5min。
dapi复染核：切片滴加dapi染液，避光孵育8min，冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。
镜检拍照：切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。（紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，分子病理技术服务，发蓝光；fam(488)绿光激发波长465-495nm，发射波长515-555 nm，发绿光；cy3红光激发波长510-560，发射波长590nm，发红光。）
分子病理学诊断主要应用于以下几个方面：1、对于肿l瘤---的检测，对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值，如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿l瘤相关---的检测，如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。3、疑难肿l瘤的诊断和分类，尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性---与淋巴细胞性肿l瘤上有着---的特---和---性。4、肿l瘤的个体化治l疗，能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点，对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断，如采用荧光原位杂交技术（fish）检测her-2基因在乳l腺l癌---中的表达情况，配合术后治l疗，指导---用药选择。
分子病理技术服务-科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司为客户提供“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”等业务，公司拥有“科锐诺”等品牌，---于技术合作等行业。，在湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼的名声---。欢迎来电垂询，联系人：王经理。
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