





原位末端凋亡检测(tunel)
实验原理: tunel技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性---内切酶被而将自身染色体dna切断成缺口或3-oh末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-oh末端,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。


原位杂交是指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,分子病理技术服务,从而对特定---顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上dna原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知---探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异dna或rna顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的基因定位。
原位杂交试验
收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%---固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%---溶液洗,然后换成,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成) 武汉科锐诺生物科技有限公司

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