





外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,外泌体nta测试服务,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。

外泌体可通过多种小分子进行修饰,因此逐渐成为递送治1疗药1物的有效载体。研究发现,grp78 在索拉菲尼耐药癌细胞中,相对于索拉菲尼敏感癌细胞中---过表达,因此,可能是 hcc 治1疗的潜在靶点。
在这项研究中,锦州医学院赵亮课题组通过修饰 bm-mscs 以表达外泌体 sigrp78,证明了 sigrp78 修饰的外泌体与索拉1非尼联合能够靶向肝细胞癌细胞中的 grp78 并抑制其生长和体外癌细胞的侵袭。此外,sigrp78 修饰外泌体与索拉1非尼联合也抑制体内癌细胞的生长和转移。证明了 sigrp78 修饰的外泌体可以使索拉1非尼耐药的癌细胞对索拉1非尼敏感并逆转耐药性。

外泌体(exosome)是活1细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡,存在于---中,包括---、唾液、尿液羊水等多种---中,并携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、rna等重要信息,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,是细胞和细胞间信息传递的重要方式。
---中外泌体 rna(---是 mirna 等非编码 rna)在健康与癌1症中存在明显 的表达差异。因此外泌体里的 mirna 常常成为某些---的 biomarker。

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