





原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交。使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的rna核苷酸片段,按---杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已 成为有效的分子病理学技术,植物花芽原位杂交技术服务,同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。

20世纪80年代的dna原位杂交开启了分子病理检测的大门,随后相继出现了在组织切片上的原位杂交,目的是检测肝1炎和肝1癌组织中的乙1肝1---。之后,越来越多的肿1瘤相关基因被发现,一批用于检测靶向治1疗药1物靶点的分子病理技术迅速问世,如fish检测乳1腺癌her2基因扩增、arms法检测肺1癌1基因突变等。

多彩色荧光原位杂交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,mfish)。它用几种不同颜色的荧光素单独或者混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个基因,扩大了fish技术的---应用。fish技术目前主要应用于染色体和dna水平上的病理诊断检测。染色体fish主要检测染色体易位、缺失、重复、变异等;dnafish主要是检测基因突变、扩增、易位、缺失。与原位杂交技术相比,fish安全、快速,特---好、定位准确。

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