武汉科锐诺生物-外泌体电镜检测

外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于peg沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、nta检测（粒径及浓度鉴定）、wb（分子标志物）。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了---检测，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

国际细胞外囊泡学会(isev) 在2014年的---，对于提取获得的外泌体，需要通过以下手段进行确认：

      双层囊膜结构是外泌体重要标志之一，但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (transmission electron microscope， tem) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm，可将被观察物体放大至数百万倍，非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。

      表观生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验，可为客户提供高外泌体tem检测服务，获得样本中外泌体典型形态特征图片 (如图一)。

外泌体是一种直径约 30 - 150 nm的纳米级囊泡，起源于细胞内吞过程中形成的内体，再从细胞中释放到胞外。几乎所有细胞都可以分泌外泌体。干1细胞里有外泌体，外泌体电镜检测，肿1瘤细胞里也有外泌体。

形象的说，外泌体是一部货拉拉，装了自家一堆乱七八糟的东西（里面有mirna，mrna和lncrna等小分子---，还有细胞1因子等蛋白），然后分泌出细胞外，再接着进入另一个细胞，卸车完事。




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