胞外囊泡透射电镜检测-科锐诺

外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于peg沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、nta检测（粒径及浓度鉴定）、wb（分子标志物）。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了---检测，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

外泌体上的tnf家族蛋白不能被膜型金属蛋白酶切割，故较为稳定，同时借助膜形成三聚体，具有很强的---细胞凋亡的活性。而且，人们认为外泌体的转运tnf家族蛋白，与各种炎1症---和自身免1疫---的产生相关。

例如，从类风1湿关1节炎---的滑膜成纤维细胞中释放出来的外泌体上，---高浓度的膜结合型tnf-α，会加重类风1湿关1节炎病情。

关于---层方面1. 促进成纤维细胞的增殖能力成纤维细胞是---层主要的细胞，胞外囊泡透射电镜检测，在体内几乎不增殖，且随着年龄增长其数量和活性也随之下降，其功能受损及细胞外基质的改变与外源性皮肤老化密切相关。

外泌体可增强成纤维细胞的增殖能力，具有浓度依赖性，可逆转紫外线---的成纤维细胞老化，但对内源性老化因素所致细胞衰老作用不明显。

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