外泌体分离提取方案。主要方案包括：
1、差速超1速离心法；
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法；
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；
3、超滤提取法；
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、nta检测（粒径及浓度鉴定）、wb（分子标志物）。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好，纯度较高的外泌体样品，胞外囊泡电镜服务，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了---检测，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。
外泌体的组成：外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(hsp 70)、cd类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白，但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式：
1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。
2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法：这种方法可以---外泌体形态的完整，特---高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不广泛。
实验室采用zetaview（品牌：particle metrix）进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒---分析（nanoparticle tracking ---ysis，nta），原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合stockes-einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。nta技术已被外泌体研究领域---为外泌体表征手段之一；相较于其他表征方式，nta技术的样本处理更简单、更能---外泌体原始状态、检测速度更快。zetaview包含的微电泳技术，也可进行zeta电位的检测。
目前配备为488nm波长的激光器，且搭配对应的滤光片，可以测量荧光抗1体标记的外泌体。
胞外囊泡电镜服务-武汉科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司为客户提供“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”等业务，公司拥有“科锐诺”等品牌，---于技术合作等行业。，在湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼的名声---。欢迎来电垂询，联系人：王经理。
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