组织外泌体提取技术服务-科锐诺生物

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    2023-11-28

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itraq (isobarictags for relative&absolute quantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由ab sciex公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将itraq标签与肽段的n-端基团和每个赖氨酸侧链相连,组织外泌体提取技术服务,可标记所有酶解肽段,平衡部位可---itraq试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一itraq试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。




外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分---的领域。外泌体中有丰富rna以及蛋白,其中rna的种类包括mirna,lncrna,mrna等[1]。大量文献---,这些rna在细胞间的相互交流中发挥着---的作用。如,外泌体中mirna可以调节下游细胞对---的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(atm),并收集培养基中富含mir-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。mir-155可以结合argonaut蛋白,并募集下游的目标mrna,从而影响细胞对---的敏感性和对---的耐受性[2]。此外,外泌体中的lncrna可以调控下游细胞的转录水平[3],mrna、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译




在透射电镜基础上,用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点,同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得---形态的外泌体,又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。




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