





在酵母双杂交系统中,bd与x蛋白融合,ad与y蛋白融合,如果x、y之间形成蛋白-蛋白复合物,分子病理技术服务,ad与bd会在空间上充分接近,重新构成结构域,启动报告基因的转录。拥有bd质粒的酵母可以在某一缺陷培养基上生长,拥有ad质粒的酵母菌可以在另一种缺陷培养基上生长,通过接合(mating)或共转化使酵母同时拥有ad与bd质粒。如果bd上的目的蛋白与ad上的诱饵蛋白存在相互作用,这样的酵母可以在三缺及四缺的培养基上生长,并启动β-半乳糖苷酶基因的转录。

首先,分子病理诊断为的诊断及鉴别诊断提供了依据,当遇到少见疑难或罕见---时,尤其是通过形态学和免yi组化染色仍不能确定的类型,这时候就需要借助分子病理技术,从基因水平来判断---的异常情况,协助病理医生作出相对准确的诊断并判断该---的预后及转归。应用领域广泛的要数软组织和骨、淋巴造血系统,因为这些系统的相似而不同,单靠镜下表现和已知的已无法满足诊断需求。另外,分子病理检测也常常运用在分子分型中,比如大家熟知的分子分型,通过基因表达谱研究,可将分为管腔a型、b型,her-2阳性型,基底样型。

原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交。使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的rna核苷酸片段,按---杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已 成为有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。

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