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外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于peg沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、nta检测（粒径及浓度鉴定）、wb（分子标志物）。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了---检测，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

外泌体mirna的主要优势：

1.外泌体是由活1细胞分泌的，代表了活1细胞内部的状态与通信信息输出，因此是较好的诊断---的生物标志物的载体；

2.mirna装入外泌体或微囊泡中，有包膜包被，可保护不被降解，稳定存在于---中；

3.外泌体在大部分---中均存在，可反应人体的正常生理和病理状态。

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外泌体富含原始修复力，应用比较广泛。目前，干1细胞外泌体在烧1伤烫1伤，难愈合性---及术后创伤修复领域的潜在应用价值比较大。

外泌体与皮肤抗1衰老我们先从皮肤衰老说起，exo粒径服务，皮肤衰老是从表皮层到---层的衰老，比如角质形成---能力减退、成纤维细胞功能异常、乳1头层变平、细胞外基质成分及含量的变化等是内外源性皮肤老化共同的病理生理改变。

整个皮肤衰老的原因，通常归于基因变异，端粒异常，蛋白质和细胞损伤增加，炎1症，细胞衰老加内源性干1细胞耗尽等问题。

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