





分子病理检测的意义:
通过分子检测协助病理诊断
某些肿1瘤具有特定的分子病理学改变,对于病理常规染色难于诊断的这些肿1瘤,进行分子病理检测可协助得出准确的病理诊断。例如淋巴1瘤的鉴别诊断往往依赖于形态和免1疫组化的综合判断,但有些时候,这些手段也不能满足诊断的需要,这时我们通过ig或tcr基因重排检测,可协助鉴别淋巴细胞的普通增殖和肿1瘤性增殖。
原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,植物组织原位杂交技术服务,称为原位杂交。使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的rna核苷酸片段,按---杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已 成为有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。

原位杂交第二天
1.
1)将探针回收,放于-20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。
2)加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。
3)置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。
4)置换0.2xssct1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。
2.
1)用mabt洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。
2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4c 冰箱过夜。
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