荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,fish)技术基本原理与显色原位杂交相同,不同之处在于fish是应用荧光素标记的探针与组织细胞中待测---反应形成杂交体,并采用荧光显微镜或激光共---显微镜观察信号表达。为了同时检测多个靶位,在荧光原位杂交技术的基础上发展起来一种新技术,植物组织原位杂交检测技术服务,即多彩色荧光原位杂交
1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。
2、细胞组织固定目的与注意事项:
(1)保持细胞结构;
(2)大限度地保持细胞内dna或rna的水平;
(3)使探针易于进入细胞或组织。
常用的固定剂是---,与其它醛类固定剂不同,---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。
分子病理应用的检测样本主要包括石蜡组织、新鲜组织、脱落细胞、全血及其他---等。石蜡切片标本厚度应在4-6μm,切片数量依据组织大小而定。样本对检测结果和分析---,病理---需要对可评估的样本进一步明确病理诊断,并评价标本有无出血、坏死和不利于---的前处理(例如含hcl脱钙液处理),病变细胞(如细胞)的总量和比例,避免假阴性。进行ngs检测前需通过病理诊断明确其的性质及含量,根据不同类型选择合适的基因panel测序。组织标本中细胞含量建议达到20%以上,低于此标准可富集后检测。未经病理评估的---结果不可单独用于分子病理---诊断目的。
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