






原位杂交是指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上dna原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知---探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异dna或rna顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的基因定位。
滴加fitc-tsa:滴加fitc-tsa试剂,避光室温反应5min。后tbst洗3次×10min,pbs洗1次×5min。
dapi复染核:切片滴加dapi染液,避光孵育8min,冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。
镜检拍照:切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波长420nm,发蓝光;fam(488)绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555 nm,发绿光;cy3红光激发波长510-560,植物组织rna原位杂交技术服务,发射波长590nm,发红光。)
分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿l瘤---的检测,对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿l瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。3、疑难肿l瘤的诊断和分类,尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性---与淋巴细胞性肿l瘤上有着---的特---和---性。4、肿l瘤的个体化治l疗,能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点,对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断,如采用荧光原位杂交技术(fish)检测her-2基因在乳l腺l癌---中的表达情况,配合术后治l疗,指导---用药选择。

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