





癌组织原位杂交实验步骤:
1. 将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2. 玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或apes。
3. 石蜡切片经常规脱蜡至水。30%h2o2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4. 暴露mrna---片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温---3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。原位杂交用pbs洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。

荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异---探针与细胞内相应的靶dna分子或rna分子杂交,通过在荧光显微镜或共---激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的dna区域或rna分子在染色体或其他细胞器中的定位。
荧光原位杂交技(fish)实验步骤:
1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(depc水配制)中固定2-12h。
2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。
3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。
4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1---ⅰ 15min-二甲1---ⅱ 15min-无水---ⅰ 5min-无水---ⅱ 5min,风干,depc水浸泡。
5、---:根据组织固定时间长短,rna原位杂交技术服务,切片于修复液中煮沸10分钟,自然冷却。后基因笔画圈,根据不同组织不同指标特性,滴加蛋白酶k(20ug/ml) 37°---20min。纯水冲洗后pbs洗3次×5min。

分子病理学是20世纪70年代初,随着---的细胞生物学和分子生物学的发展和相互渗透的一个病理学分支学科。分子病理学是应用分子生物学理论、技术和方法,研究---发生1发展过程中蛋白质和---水平变化对---发生过程的影响及其作用,探讨---发生的分子机制,揭示---本质的现代病理学的分支学科。深入进行---分子病理学研究,将为---的精1准诊断和精1准治1疗提供重要的科学依据。

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