石蜡包埋呢是现在病理技术中很常规的一种服务项目,而石蜡包埋的实验目的就是掌握石蜡包埋实验技术;理解组织脱水、透明及浸蜡原理;熟悉不同组织的结构特点。
而石蜡包埋实验需要用到的主要试剂有:0.85%生理盐水,线粒体三维重构检测技术服务,75%酒精,85%酒精,95%酒精,溶液,无水---,48℃-60℃的石蜡。
有人注意到石蜡包埋会使用反复用过的石蜡,这是因为石蜡在刚出厂时其密度比较疏松,经过反复多次融化和冷却后的石蜡密度会增加,可以更贴近包埋组织的密度以及硬度,在进行包埋组织时不易造成蜡块的脱裂。所以一般在使用新蜡之前会在熬一下。
病理切片的制作步骤注意事项:
大小标本必须分开处理,大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。
固定液必须及时更换,固定后必须流水冲洗。根据切片量化的控制,专人负责更换药剂,以---每一批切片的恒定。
固定、脱水温度不得高于37℃。
包埋用石蜡必须过滤。
试剂必须及时更换。
切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%---24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水---i 30min-无水---ii 30min-醇---5-10min-i5-10min-ii5-10min-蜡i1h-蜡ii1h-蜡iii 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水---组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
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