





原理
原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的---复性结合而使得组织细胞中的特------得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在---的原有位置上显示出来。
经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检dn---段或mrna进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检---的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mrna在胞质中的表达。


原位杂交是指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上dna原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知---探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异dna或rna顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的基因定位。
原位杂交的应用范围:
细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;
感1染组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类乳1头状瘤1---和巨细胞---dna的检测;
癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;
基因在染色体上的定位;
检测染色体的变化,植物原位杂交,如染色体数量异常和染色体易位等;
分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿1瘤的诊断和生物学剂量测定等。

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