





itraq (isobarictags for relative&absolute quantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由ab sciex公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,外泌体电镜,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将itraq标签与肽段的n-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可---itraq试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一itraq试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,外泌体电镜技术服务,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。

外泌体研究开展的如火如荼。不论是 sci 文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,如何?
现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和 western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒---分析(nanoparticle tracking ---ysis,外泌体电镜检测, nt a),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合 stockes-einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。nt a技术已被外泌体研究领域---为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,nt a技术的样本处理更简单、更能---外泌体原始状态、检测速度更快。
外泌体(exosome)是活1细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡,存在于---中,包括---、唾液、尿液羊水等多种---中,并携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、rna等重要信息,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,是细胞和细胞间信息传递的重要方式。
---中外泌体 rna(---是 mirna 等非编码 rna)在健康与癌1症中存在明显 的表达差异。因此外泌体里的 mirna 常常成为某些---的 biomarker。

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