





1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。
2、细胞组织固定目的与注意事项:
(1)保持细胞结构;
(2)大限度地保持细胞内dna或rna的水平;
(3)使探针易于进入细胞或组织。
常用的固定剂是---,与其它醛类固定剂不同,---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。

阻断内源性---化物酶:滴加3%1甲1醇-h2o2,室温避光孵育15min,将玻片置于pbs(ph7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
预杂交:滴加预杂交液,37°c孵育1h。
杂交:倾去预杂交液,滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液,植物基因组原位杂交测试服务,浓度6ng/ul,恒温箱37度杂交过夜。
杂交后洗涤:洗去杂交液,2×ssc,37°c 洗10min,1×ssc,37°c洗2×5min,0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多,可以增加---胺洗涤。
滴加封闭液:滴加封闭血1清(正常兔血1清),室温30min。
滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶(anti-dig-hrp):倾去封闭液,滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min,后pbs洗3次×5min。
分子病理学是一门新兴学科,是在基因水平上用分子生物学技术研究---发生1发展的一个病理学分支学科。分子病理学进行的检测通常称之为---,即取检测者的肿1瘤组织、胸水或---等,经提取和扩增其基因信息后,通过相应的分子生物学技术,对被检测者细胞中的dna分子的基因信息进行检测,分析他的基因状态,从而对肿1瘤的诊断或治1疗提供一定的帮助。

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