





后固定:胃蛋白酶---后才需要。固定液为1%---/0.1 m pbs(ph7.2-7.6),含有1/1000 depc。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
原位杂交的预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×ssc洗涤5分钟×2次;37℃0.5×ssc洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×ssc洗涤15分钟×1次(如果有非特---染色,重复0.2×ssc洗涤15分钟×1-2次)。
分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿l瘤---的检测,对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿l瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。3、疑难肿l瘤的诊断和分类,尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性---与淋巴细胞性肿l瘤上有着---的特---和---性。4、肿l瘤的个体化治l疗,能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点,对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断,提供酵母双杂交技术服务,如采用荧光原位杂交技术(fish)检测her-2基因在乳l腺l癌---中的表达情况,配合术后治l疗,指导---用药选择。

1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。
2、细胞组织固定目的与注意事项:
(1)保持细胞结构;
(2)大限度地保持细胞内dna或rna的水平;
(3)使探针易于进入细胞或组织。
常用的固定剂是---,与其它醛类固定剂不同,---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。

科锐诺生物科技-提供酵母双杂交技术服务由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是湖北 武汉 ,技术合作的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、---发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在科锐诺---携全体员工热情欢迎---垂询洽谈,共创科锐诺美好的未来。
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