染色体原位杂交技术服务-科锐诺

原位杂交杂交液注意事项：

       （1）杂交液内除含一定浓度的标记探针外，还含有较高浓度的盐类、---胺、---葡聚糖、牛血1清白蛋白及载体dna或rna等。

       （2）杂交液中含有较高浓度的na+可使杂交率增加，可以减低探针与组织标本之间的静电结合。---胺可使tm降低，杂交液中含每1%的---胺可分别使rna：rna，rna：dna，dna：dna的杂交温度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。，所以杂交液中加入适量的---胺，可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。---葡聚糖能与水结合，从而减少杂交液的有效容积，提高探针有效浓度，以达到提高杂交率的目的（尤其对双链---探针）。

       在杂交液中加入牛血1清白蛋白及载体dna或rna等，都是为了阻断探针与组织结构成分之间的非特---结合，染色体原位杂交技术服务，以减低背景。

意义

在研究dna分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，能过氢键结合，形成dna-dna、dna-rna或 rna-rna 双键分子的特点，应用带有标记的（有性同位素，如3h、35s、32p、荧光素生物素、等非性物质）dna或rn---段作为---探针，与组织切片或细胞内待测---（rna或dna）片段进行杂交，然后可用自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的 mrna或dna 的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有---的敏感性和特---，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

多彩色荧光原位杂交(multicolorfluorescenceinsituhybridization，mfish)。它用几种不同颜色的荧光素单独或者混合标记的探针进行原位杂交，能同时检测多个基因，扩大了fish技术的---应用。fish技术目前主要应用于染色体和dna水平上的病理诊断检测。染色体fish主要检测染色体易位、缺失、重复、变异等;dnafish主要是检测基因突变、扩增、易位、缺失。与原位杂交技术相比，fish安全、快速，特---好、定位准确。




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