科锐诺生物-植物rna原位杂交测试服务

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    2024-3-3

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目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、pcr、荧光定量pcr、基因芯片和dna测序技术dna原位杂交主要用于基因定位、特异基因(如病原微生物基因)检测等;rna原位杂交则用于基因表达检测。原位杂交技术的优点是操作简单,可直接定位组织,价格低廉,信号稳定,储存方便,植物rna原位杂交测试服务,可做组织学评价,是目前应用较多的分子病理技术之一。




原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的pbst溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的pbst溶液,放置5分钟

3) 置换成pbst溶液,放置5分钟,重复一次

4) 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2) 用pbst溶液轻洗,在pbst中放置5分钟。

3) 用4%---的pbs溶液固定20分钟,室温。

4) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

2. 预杂交

1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的hyb+取代hyb-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

3. 杂交

1)吸去预杂交的hyb+,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。






基因芯片又称dna芯片或dna微阵列。其原理是在固体载体(硅片、玻片、硝1酸纤维素膜)上按照特定的排列方式集成大量已知dna/cdn---段,形成dna/cdna微矩阵。   基因芯片技术是一门新兴的技术,由于该技术能在一次实验中自动、快速、敏感地同时检测数千条序列,而且获得的序列信息高度特异、稳定。根据探针类型分为dna芯片和cdna芯片,前者用于检测基因突变,实现肿1瘤早期诊断、判断预后及治1疗;后者用于检测基因表达,对肿1瘤进行发现性分类和预测性分类。





植物rna原位杂交测试服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供---的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:王经理。
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