





外泌体研究开展的如火如荼。不论是 sci 文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,如何?
现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和 western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,胞外囊泡粒径及浓度检测,今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒---分析(nanoparticle tracking ---ysis, nt a),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合 stockes-einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。nt a技术已被外泌体研究领域---为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,nt a技术的样本处理更简单、更能---外泌体原始状态、检测速度更快。
外泌体上的tnf家族蛋白不能被膜型金属蛋白酶切割,故较为稳定,同时借助膜形成三聚体,具有很强的---细胞凋亡的活性。而且,人们认为外泌体的转运tnf家族蛋白,与各种炎1症---和自身免1疫---的产生相关。
例如,从类风1湿关1节炎---的滑膜成纤维细胞中释放出来的外泌体上,---高浓度的膜结合型tnf-α,会加重类风1湿关1节炎病情。

除了用nta方法,该团队另基于acetylcholinesterase(一种已知的外泌体表达蛋白)评估三种试剂盒提取外泌体的得率。从nta结果看,对于血1清和血浆样本,exo-spin的提取量高,是其他两种试剂盒的1-3倍;相对来说,脑脊髓液的提取率都比较低,exoquick?提取得到的外泌体浓度低。从基于acetylcholinesterase的分析结果看,其数值高于nta方法,且exo-spin得到的外泌体浓度高于其他两种试剂盒。

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