科锐诺生物科技-水稻原位杂交技术服务

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    2024-3-15

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分子病理学是一门新兴学科,是在基因水平上用分子生物学技术研究---发生1发展的一个病理学分支学科。分子病理学进行的检测通常称之为---,即取检测者的肿1瘤组织、胸水或---等,经提取和扩增其基因信息后,通过相应的分子生物学技术,对被检测者细胞中的dna分子的基因信息进行检测,分析他的基因状态,从而对肿1瘤的诊断或治1疗提供一定的帮助。



菌落的裂解及dna结合于纤维素滤膜

(1) 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/l naoh的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。

(2) 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/l naoh重复步骤(1)。

(3) 吸干滤膜,水稻原位杂交技术服务,将滤膜转移到新的带有1mol/l tris·cl(ph7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。

(4) 吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/l nacl、0.5mol/l tris·cl (ph7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。

(5) 将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定dna。

(6) 将固定在膜上的dna与32 p标记的rna进行杂交。










荧光定量pcr(realtimepcr)技术是近几年基于普通pcr技术发展的一种新技术。它借助荧光信号来检测pcr产物,通过荧光染料或荧光标记的特异探针,对pcr产物进行标记---,在扩增过程中,每经过一次循环,荧光定量pcr仪就会收集一次荧光信号,实时检测整个pcr进程。用荧光定量pcr法检测目的基因仅需检测样本是否具有扩增信号即可,且pcr反应具有---扩增的高1效性,可检测出微小突变。根据探针标记不同可分为taqman探针法和arms法。

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