点对点酵母双杂交验证实验流程
1、诱饵蛋白毒性及自激1活检测；
2、共转化：分别将诱饵/捕获质粒（pgbkt7-bait/pgadt7-prey）、阳性对照质粒（pgbkt7-p53/pgadt7-t）、阴性对照质粒（pgbkt7-lam/pgadt7-t）分别共转到y2h gold感受态细胞中，涂布于ddo平板培养；
3、点板验证：分别从平板上挑单克1隆稀释10倍、100倍、1000倍，然后点板到tdo/x/a和qdo/x/a固体培养基进行验证；
4、实验数据与报告整理。
阻断内源性---化物酶：滴加3%1甲1醇-h2o2，室温避光孵育15min，将玻片置于pbs（ph7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
预杂交：滴加预杂交液，37°c孵育1h。
杂交：倾去预杂交液，滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液，浓度6ng/ul，恒温箱37度杂交过夜。
杂交后洗涤：洗去杂交液，2×ssc，37°c 洗10min，1×ssc，37°c洗2×5min，0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多，可以增加---胺洗涤。
滴加封闭液：滴加封闭血1清（正常兔血1清），室温30min。
滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶（anti-dig-hrp）：倾去封闭液，滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min，后pbs洗3次×5min。
原位杂交是在分子生物学领域应用---广泛的实验技术之一，植物染色体压片技术服务，是在研究生物体发育过程中的一种---重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization，其中in situ为拉丁文，字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的---探针与组织切片或细胞中的待测---中的互补序列杂交， 从而对组织细胞中的---进行定性、定位和相对定量分析。是一种直接、简便的研究基因定位和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理
植物染色体压片技术服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司位于湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前科锐诺在技术合作中享有---的声誉。科锐诺取得---商盟，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。科锐诺全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。
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